بازیگران اتاق عمل سیامک انصاری، سپند امیرسلیمانی، علی اوجی، لیلا ایرانی، پوریا ایرایی، شراره ارمغانی، تینا اسدی، بهناز توسلی، فرزانه تفرشی، فلامک جنیدی، جوانه دلشاد، سید جواد رضویان، آذین رئوف، سحر زکریا، نادر سلیمانی، ماندانا سوری، شادان شهیدی، یوسف صیادی، الیکا عبدالرزاقی، گل ناز عباسی، مهران غفوریان، رضا فیضنوروزی ، نیما فلاح، شبنم فرشادجو، عارف لرستانی، علی لکپوریان، مهران مدیری، دریا مرادی دشت، رضا نیکخواه، رامین ناصرنصیر، سام نوری، سحر ولدبیگی، محمدرضا هدایتی، فاطمه هاشمی و ساعد هدایتی هستند.
عوامل تولید کننده «اتاق عمل» عبارتند از: دستیار اول کارگردان و برنامهریزی: پوپک مظفری، صدابرداری، صداگذاری و میکس: محمود خرسند، طراح نور: جمال شمس، تصویر: منوچهر مظفری، جمال شمس، امیر احمدپور، کامران جمشیدیان، طراح گریم: مهرداد شکرابی، طراح صحنه و لباس: مهران مدیری، طراح دکور: علیرضا مفاخری، سرپرست اجرای دکور: مرتضی مفاخری، سرپرست لباس: شادی رستگار، تدوین: امیر ادیبپرور، موسیقی: بهرام دهقانیار، مدیر روابط عمومی: وفا ملکزاده، تیتراژ: سیامک فیلیزاده، منشی صحنه: بهناز تاجیک، مدیر تولید: ابوالفضل نصیر، مدیر تدارکات: محمودرضا جوانشیر، طراح و کارگردان: مهران مدیری و تهیهکننده: حمیدرضا مهدوی.